Caracterizacion fenotipica y funcional de la actividad de la glicoproteina p. Implicaciones en el estudio de la resistencia a agentes antineoplasticos

Abstract

El producto del gen MDR1, la glicoproteína P (P-gp), actúa como una bomba de extrusión de determinados agentes citotóxicos, y cuya sobreexpresión puede resultar determinante en el fracaso del tratamiento antineoplásico. La rodamina 123 (r123) es una sonda fluorescente de baja toxicidad utilizada en la medición de la actividad funcional de la P-gp tanto en tejido normal como maligno. El análisis de la variación de fluorescencia en la captación y eliminación de r123, junto a inhibidores de la bomba, permite la investigación del fenotipo de resistencia en muestras de origen neoplástico. En este estudio se ha determinado la actividad funcional de la P-gp en líneas celulares de origen neoplásico, teniendo en cuenta que la citotoxicidad de la sonda, las condiciones de cultivos, la integridad de las membranas celulares, así como el efecto de inhibidores de la P-gp, pueden alterar las mediciones del eflujo de r123. La obtención de líneas celulares resistentes a vinblastina, ha permitido demostrar que: 1/ la determinación de resistencia a fármacos mediante ensayos de eliminación de r123 debe evaluarse cuidadosamente en cada modelo experimental; 2/ la actividad de la P-gp es necesaria pero no suficiente para conferir resistencia a fármacos; 3/ el análisis de la modulación de mutante p53 y la P-gp se encuentran sobreexpresadas como resultado de la exposición a concentraciones eliminación de r123 es útil en el ajuste de las dosis óptimas de inhibidores del fenotipo de resistencia; y 4/ la proteína progresivamente mayores del agente antimitótico vinblastina.