Control de legionella en instalaciones de red de agua hospitalaria

Resumen

Controlar la calidad del agua en instalaciones sanitarias es esencial para prevenir la legionelosis. La elección de los puntos de muestreo que sean representativos de la instalación y utilizar métodos de cultivo sensibles para la detección de Legionella spp. son pilares básicos para asegurar un buen control. Diseñamos un método optimizado basado en la identificación y monitorización de puntos críticos (PC), definidos como el inicio y el final de cada tramo de la instalación, un punto intermedio, zonas con pacientes susceptibles y zonas con recuentos altos de Legionella spp., representativos del total de puntos terminales (PT) con el objetivo de realizar un seguimiento periódico para su control. Para aumentar la sensibilidad del cultivo de Legionella spp. incorporamos además del GVPC (ISO 11731:2007) un medio enriquecido (BCYE), y comparamos los resultados del log no UFC/L. Como objetivo secundario analizamos los métodos de identificación de Legionella spp. mediante inmunoaglutinación, MALDI-TOF-MS y genotipado por SBT. Métodos: La instalación consta de 869 PT. Seleccionamos 99 PC y comparamos el log no UFC/L de Legionella spp. de los PT vs PC (2006-2018; N=2.137). Analizamos mediante cultivo en BCYE y GVPC 1.306 muestras de agua sanitaria (2010-2015) (procedimiento interno acreditado según ISO 11731). Subcultivamos en BCYE y Wcys hasta tres colonias compatibles. Las colonias confirmadas como Legionella spp. se procesaron mediante aglutinación en látex para identificar los serogrupos. Las colonias identificadas como Legionella no-pneumophila y las no aglutinables se identificaron por MALDI-TOF-MS (score>=2). Seleccionamos 98 cepas congeladas de L. pneumophila y fueron secuenciadas en la Unidad Mixta en Infección y Salud Pública FISABIO/CSISP/UV. Resultados: En todos los pabellones de la instalación el log no de UFC/L informados en los PC es superior que en los PT (p<0.05) o no hay diferencia significativa entre ellos (p>0.05). Añadir BCYE mejoró la sensibilidad: media UFC 2000 unidades mayor que GVPC (p = 0,000). Con microbiota interferente, ambos medios son similares; en ausencia, BCYE es cuatro veces más sensible que GVPC (p = 0,000). Identificamos 1002 cepas de Legionella spp. mediante ausencia de crecimiento en Wcys y confirmamos la identificación por aglutinación en látex, siendo la especie mayoritaria L. pneumophila sg 2-14 (84%). Identificamos el 98% de los aislados por MALDI- TOF-MS. La ST1362 fue la más frecuente. Conclusiones: El criterio de elección de PC propuesto para el control de instalaciones de agua sanitaria es muy útil y permite que los resultados obtenidos sean representativos de las tasas de contaminación de la instalación. Incluir BCYE en el análisis de agua sanitaria mejora la recuperación de Legionella spp. La identificación por aglutinación con látex y MALDI-TOF- MS mejoran el conocimiento y el control de la instalación. El estudio mediante SBT puede facilitar respuestas rápidas durante investigaciones epidemiológicas.