Cultivo in vitro de plantas bulbosas de la familia amaryllidaceae. Micro-propagación y produccion de galantamina por cultivo de organos

Résumé

Durante el presente trabajo se han introducido al cultivo in vitro tres especies de Amarilidáceas sudamericanas de distribución y abundancia limitadas. Eucrosia stricklandii (Baker) Meerow, Stenomesson incarnatum (H.B.K.) Baker y Eucharis amazonica Linden ex Planchon. Los resultados alcanzados se pueden resumir en el siguiente protocolo: 1,- INDUCCIÓN DE BROTES, medio MS sumplementado con carbón activado (5 g/l) 2,- MULTIPLICACION SECUNDARIA, medio MS suplementado con 2,4-D y BAP (Bencilaminopurina) a la concentración de 0.1 y 1 mg/l respectivamente. Para S. Incarnatum que mostró una baja respuesta a la adición de fitoreguladores, esta multiplicación se consigue usando la placa basal de los brotes obtenidos in vitro. 3,- CULTIVO EN MEDIO LÍQUIDO, a la concentración de 60 ó 90 g/l de sacarosa y bajo agitación (110 r.p.m) con repicajes frecuentes (cada 14 días) para acelerar el crecimiento de los explantos. 4,- ENGROSAMIENTO DE BULBOS, medio MS sólido con 60 ó 90 g/l de sacarosa. 5,- EMPLAZAMIENTO, medio MS suplementado con ácido naftalenacético (NAA) a 0.1 mg/l. 6,- ACLIMATIZACION, perlita:vermiculita (2:1) como sustrato y condiciones de fotoperíodo largo (aproximadamente 100% de supervivencia). Asimismo se utilizaron agregados meristemáticos de Narcissus confusus Pugsley, una especie con alto contenido de galantamina (un alcaloide con gran valor añadido debido a su utilización en la farmacoterapia de la enfermedad de Alzheimer), con la finaldiad de incrementar la producción de este alcaloide por cultivo de los explantos en medio líquido. Se observó que la adición de PPM un complejo antibiótico-antimicótico, no afectó el crecimiento de los explantos ni la producción de alcaloides a la dosis recomendada (0,5 ml/l). Por otra parte, la modificación de las conentraciones e Cl2Ca, ZnSO4, Cl2Co y CuSDO4, así como la adición de vanadio al medio resultaron en una disminución de la producción de glant