Implantación de un método para la detección de virus infecciosos en aguas de consumo humano

Résumé

Los virus entéricos, principalmente norovirus (NoV) y el virus de la hepatitis A (VHA), son una de las principales causas de brotes de transmisión alimentaria, en muchos casos asociado a la contaminación del agua. Actualmente las técnicas moleculares son las más habituales para la detección de estos patógenos en aguas y alimentos, aunque todavía existen dudas acerca del significado de la presencia de estos genomas víricos en términos de seguridad alimentaria. Por lo tanto, resulta importante validar métodos para (i) detectar NoV y VHA en aguas de consumo y (ii) evaluar su potencial infectividad. En este estudio, se han optimizado protocolos para la concentración, detección y cuantificación de virus entéricos en muestras de agua de entrada y salida de estación de tratamiento de agua potable (ETAP), acoplando tratamientos de viabilidad para inferir la potencial infectividad de las muestras. El método de floculación con hidróxido de aluminio combinado con el sistema oficial RT-qPCR para la detección de virus en alimentos, ISO 15216:2017, ha sido validado para detectar y cuantificar NoV genogrupo I (GI), NoV GII y VHA en aguas de entrada de ETAP, demostrando niveles de recuperación del 13,1, 7,5, y 0,6%, respectivamente. Por otro lado, se ha evaluado la filtración tangencial con cartuchos de diálisis para la concentración de virus a partir de 20 L de agua de consumo, optimizando la etapa de concentración secundaria mediante la floculación con polietilenglicol. Utilizando este procedimiento, se obtuvieron niveles de recuperación de 38,5, 23,1, y 3,8% para NoV GI, NoV GII y VHA. Finalmente, estos procedimientos se han transferido a los laboratorios de GAMASER donde se ha analizado la presencia de virus entéricos potencialmente infecciosos en dos plantas de tratamiento de agua potable. Los resultados para la detección de estas muestras han sido negativos para la presencia de NoV GI, NoV GII y VHA, con un nivel de recuperación de mengovirus superior al 1%, validando así los resultados.