Ocartoxina aefectos sobre el adn y sobre la expresión génica

Zusammenfassung

OCRATOXINA A: EFECTOS SOBRE EL ADN Y SOBRE LA EXPRESIÓN GENICA #RESUMEN: Ocratoxina A: efectos sobre el ADN y sobre la expresión génica. La ocratoxina A (OTA) es una micotoxina producida por las especies Aspergillus y Peni culi uní, que contamina gran variedad de alimentos, dando lugar a una exposición crónica humana. La OTA es nefrotóxica en varias especies y carcinogénica en roedores, pero se desconoce su mecanismo de acción. El fin del presente trabajo de investigación ha sido profundizar en su mecanismo de toxicidad estudiando sus efectos sobre el ADN y sobre la expresión génica. En primer lugar, en la linea celular renal humana HK-2, la ota indujo daño oxidativo en el ADN y un aumento de los niveles de especies reactivas de oxigeno (ERO) sólo a concentraciones citotóxicas. La N-acetil-L-cisteina, fue capaz de disminuir estos efectos. Por lo que, estos resultados sugerían que el estrés oxidativo precede a la citotoxicidad y genotoxicidad de la ota. En segundo lugar, en la misma linea celular, se observó una sobre-expresión de los genes de la cadena mitocondrial transportadora de electrones y de estrés oxidativo. sin embargo, los genes en respuesta al daño en el ADN estaban reprimidos. Finalmente, en ratas Fisher 344 macho, tras una administración oral repetida, se observó una disminución de las defensas antioxidantes en el riñon, asi como, represión de los genes relacionados con el metabolismo y el transporte. Los genes de respuesta al daño en el ADN no se modificaron. En conclusión, los resultados de este trabajo apoyan la hipótesis de que la ota es un compuesto genotóxico que no reacciona con el ADN, y que produce su efecto tóxico a través de un mecanismo epigenético atribuible al estrés oxidativo celular. Por lo que, se puede establecer un umbral de toxicidad a partir del cual fijar unos limites tolerables de exposición humana. Ochratoxin A: effects on DNA and gene expression Ochratoxin A (OTA) is a mycotoxin produced by Aspergillus and Penicillium species that contaminate a variety of food items, resulting in chronic human exposure. OTA is nephrotoxic in several species and produces renal tumours in rodents, but its mechanism of action is unknown. Therefore, the aim of the present research project was to provide more insights into the molecular mechanism of OTA toxicity by focusing on the effects on DNA integrity and gene expression. Firstly, in the human kidney cell line HK-2, OTA did not induce DNA damage at noncytotoxic concentrations, but oxidative DNA damage and increased level of reactive oxygen species (ROS) were observed at cytotoxic concentrations. Furthermore, N-acetyl-L-cysteine was able to produce a slight protective effect against OTA-induced ROS increase, cytotoxicity and DNA damage. These results suggested that oxidative stress precedes cytotoxicity and genotoxicity. Secondly, in the same cell line, up-regulation of genes involved in the mitochondrial electrón transport chain and in oxidative stress response was observed. However, genes related to DNA damage response were down-regulated. Finally, in male Fisher 344 rats, after a repeated oral administration, antioxidant defence inhibition was observed in kidney, as well as, down-regulation of metabolism and transport-related genes. DNA damage response genes were not affected. Altogether, the results of this work support the nypothesis that ota isa DNA non-reactive genotoxic compound that produces its toxic effect through an epigenetic mechanism attributable to cellular oxidative stress. Therefore, a toxicicity threshold could be established for determining tolerable human exposure 1 i mits