Transformación genética de cítricos. Expresión de los genes p23 y p25 del virus de la tristeza de los cítricos (ctv) para evaluar la resistencia frente a ctv

Resumen

Se ha confirmado el carácter supervirulento de la cepa oncogénica A281 en diferenes especies de cítricos. Se ha encontrado una correlación directa entre la supervirulencia de la cepa A281 y la alta capacidad de transformación de su derivada desarmada EHA105. Ésta es capaz de producir una transformación estable en varios genotipos de cítricos hasta 22 veces mayor que la cepa desarmada de C58. Esta diferencia se ha atribuido a la alta inducción y expresión de los genes vir de pTiBo542. La introducción de copias adicionales de virG de pTiBo542 en la cepa C58 incrementó drásticamente la frecuencia de transformación estable en cítricos, lo que sugiere que tanto la cantidad como la calidad de virG son determinantes en la capacidad de las cepas de Agrobacterium para la transformación de los cítricos. Se ha expresado de forma estable y por la primera vez en una especie leñosa, la proteína verde fluorescente (GFP) en plantas transgénicas de diferentes especies de cítriocs. La utilización de esta proteína como marcador vital,permitió la pronta y fácil selección in vivo de los brotes transgéncios y la discriminación de los escpaes. Además este marcador permitio la selección de brotes transgénicos en ausencia del agente de selección (en nuestro caso la Kanamicina). Esto abre la posibilidad de la obtención de plantas transgénicas sin la utilización de genes marcadores de selección que confieren resistencia a antibióticos o herbicídas. Estas resistencias han sido siempre cuestionadas para la comercialiación de plantas transgénicas. Se ha conseguido establecer un procedimiento eficiente de transformación genética de naranjo amargo. Este protocolo perimitó incorporar el gen de la proteína de la cápsida de CTV en un número suficiente de plantas para poder evaluar esta estrategia para conseguir protección frente al virus. La expresión de la proteína p23 de CTV enlima Mexicana provoca la aparición de sí