Respuesta cultural y morfogenética de protoplastos de lycopersicon esculentum cv. Uc82b, lycopersicon cheesmanii la 140 trg. Y lycopersicon pennellii p47 trg. Selección y caracterización de callos híbridos entre lycopersicon esculentum cv. Uc82b (+) lycopersicon cheesmanii la 1401 trg. Y lycopersicon esculentum cv uc82b (+) lycopersicon pennellii p47 trg en experimentos de fusión de protoplastos

Résumé

El trabajo de la tesis se planteó con la finalidad de desarrollar una metodología para llevar a cabo experimentos de fusión de protoplastos entre Lycopersicon esculentum (+) Lycopersicon cheesmanii y Lycopersicon esculentum (+) Lycopersión pennellii. El objetivo a largo plazo es abordar un programa de hibridación asimétrica dirigida a la transferencia de los genes que determina la tolerancia a la salinidad y estrés hidrico desde los parentales silvestres al tomate cultivado. El estudio de la respuesta cultural y morfogenética de los protoplastos aislados a partir Lycopersicon esculentum, 1. Cheesmanii y L. Pennelli y L. Pennellii ha puesto en evidencia distintos aspectos que influyen en el aislamiento, cultivo y regeneración de plantas a partir de protoplastos de cada especie. Se ha consegudio la regeneración de plantas en los tres casos pero los callos procedentes de L. Pennelliii tienen una mayor aptitud morfogenética que los de L. Esculentum y L. Cheesmanii. Se han obtendio callos híbridos en experimenyos de fusión de protoplastos entre L. Esculentum (+) L cheesmanii y L. Esculentum (+) L. Pennellii. La caracterización molecular mediante PCR ha permitido comprobar la presencia de bandas caracteristicas de los genes nptII y unidA, en los callos seleccionados como presunyos hibridos en los distintos experimentos de fusión realizados. El análisis histoquímico X-gluc reveló también la expresión del fen delator en la mayoría de estos callos. Además, los análisis de polimorfismo del Adn, mediante RPAD y ap-pcr, mostraron la naturaleza hibrida de los callos seleccionados. Estos análisis mostraron la pérdida gradual de genoma del parental L. Cheesmanii en el cruce con L. Esculentum y de los dos parentales en el cruce L. Esculentum (+) L. Pennellii (inactivo con UV).