Interaction between colicin a pore-forming domain and its cognate immunity protein
- Metola Martínez, Ane
- Félix María Goñi Urcelay Director
- Ana Rosa Viguera Rincon Director
Defence university: Universidad del País Vasco - Euskal Herriko Unibertsitatea
Fecha de defensa: 14 July 2017
- Gunnar Von Heijne Chair
- Helena Ostolaza Etxabe Secretary
- Ismael Mingarro Muñoz Committee member
Type: Thesis
Abstract
La colicina A y en concreto el dominio formador de poros, pfColA es expresado por Escherichia coli y resulta tóxico para cepas relacionadas. Las bacterias productoras de la toxina expresan la proteína de inmunidad Cai que las protege de la misma toxina que producen. Cai inhibe la formación de poros y subsecuente muerte celular mediante una interacción directa hélice-hélice en la membrana interna de la bacteria. En el presente trabajo se analizó la interacción entre Cai y pfColA en diferentes entornos como micelas de detergente, vesículas lipídicas o en la membrana bacteriana. El estudio funcional en vesículas lipídicas demostró que pfColA es capaz de conducir protones y que esta actividad se ve inhibida por Cai. Esta actividad resultó ser dosis dependiente, saturable y de la que se deduce un complejo 1:1. El par Cai-pfColA fue co-expresado en la membrana interna de E. coli y se consiguió aislar el complejo integro en detergente de tipo alkilglucósido. Por último, la formación de complejo fue testada también en solución en micelas de detergente, donde se forma un complejo muy estable con una afinidad en el rango de micromolar.