Caracterización bioquímica del nervio óptico en el ratón que sobreexpresa el gen P53análisis de estrés oxidativo

  1. R. Gallego-Pinazo
  2. V. Zanón-Moreno
  3. S. Sanz
  4. V. Andrés
  5. M. Serrano
  6. I. García-Cao
  7. M.D. Pinazo-Durán
Revista:
Archivos de la Sociedad Española de Oftalmologia

ISSN: 0365-6691

Año de publicación: 2008

Volumen: 83

Número: 2

Páginas: 105-112

Tipo: Artículo

DOI: 10.4321/S0365-66912008000200008 DIALNET GOOGLE SCHOLAR lock_openAcceso abierto editor

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Resumen

Objetivos: El gen supresor tumoral p53 detiene la proliferación y la muerte celular por apoptosis subsecuente a la acción de diversos factores, entre ellos el estrés oxidativo. La proteína p53 es fundamentalmente un regulador de la expresión génica. Utilizando ratones genéticamente manipulados para presentar una copia extra del gen p53 (transgénicos super p53) frente a ratones controles, hemos investigado el estado oxidativo y antioxidante en los nervios ópticos, en relación a p53. Método: Se han utilizado ratones de la cepa C57BL/6 de 12 meses de edad en dos grupos: 1) grupo super p53 (Sp53) y 2) grupo de controles wild-type (GC). Los ratones fueron anestesiados en atmósfera de éter, extrayendo los globos oculares y nervios ópticos que se lavaron en PBS, manteniendo las muestras en nitrógeno líquido y en congelador de -85ºC hasta su procesamiento. Se homogeneizaron 3-4 nervios ópticos por cada eppendorf, clasificando por grupos y determinando mediante métodos enzimático-colorimétricos la actividad peroxidativa y actividad antioxidante total y la concentración de oxido nítrico. Resultados: Existe aumento significativo en la formación de radicales libres via peroxidación lipídica (p<0,001), de la actividad antioxidante (p<0,001) y síntesis de óxido nítrico (p<0,05) en los nervios ópticos de los ratones transgénicos super p53, frente a los ratones controles. Conclusiones: La presencia de una copia extra del gen p53 está ligada a modificaciones de la actividad redox en el nervio óptico del ratón, sugiriendo que p53 otorga una mayor resistencia a la agresión oxidativa. Valoramos la utilización de este modelo de ratón transgénico en procesos neurodegenerativos relacionados con el estrés oxidativo y la inducción de la apoptosis, como la neuropatía óptica glaucomatosa o la degeneración macular asociada a la edad.

Referencias bibliográficas

  • Muñoz, A. (1997). Genes supresores de tumores y genes de reparación del DNA. Editorial Hélice. Madrid.
  • Zavaglia, D, Lin, EH, Guidetti, M, Pluquet, O, Hianaut, P, Favrot, MC. (2005). Poor intercellular transport and abscence of enhanced antiproliferative activity alter non-viral gene transfer of VP22-P53 or P53-VP22 fusions into p53 null cell lines in vitro or in vivo. J Gene Med. 7. 936-944
  • García-Cao, I, Carcía-Cao, M, Martín-Caballero, J, Criado, LK, Klatt, P, Flores, JM, et, al. (2002). «Super p53» mice exhibit enhanced DNA damage response, are tumor resistant and age normally. EMBO J. 21. 6225-6235
  • Steller, H. (1995). Mechanisms and genes of cellular suicide. Science. 267. 1445-1449
  • Odin, L, Favrot, M, Poujol, D, Mitchot, JP, Moingeon, P, Tartaglia, J. (2001). Canarypox virus expressing wild type p53 for gene therapy in murine tumors mutated in p53. Cancer Gene Ther. 8. 87-98
  • Boultwood, J. (2001). Ataxia telangiectasia gene mutations in leukaemia and lymphoma. J Clin Pathol. 54. 512-516
  • Bates, S, Voudsen, KH. (1996). P53 in signaling checkpoint arrest or apoptosis. Curr Opin Genet Dev. 6. 12-18
  • Lotem, J, Peled-Kamar, M, Groner, Y, Sachs, L. (1996). Cellular oxidative stress and the control of apoptosis by wild type p53, cytotoxic compounds and cytokines. Proctl Natl Acad Sci USA. 93. 9166-9171
  • Raff, MC. (1992). Social controls on cell survival and cell death. Nature. 356. 397-400
  • Guo, L, Moss, SE, Alexander, RA, Ali, RR, Fitzke, FW, Cordeiro, MF. (2005). Retinal glanglion cell apoptosis in glaucoma is related to intraocular pressure and IOP-induced effects on extracellular matrix. Invest Ophthalmol Vis Sci. 46. 175-182
  • Kerrigan, LA, Zack, DJ, Quigley, HA, Smith, SD, Pease, ME. (1997). TUNEL-positive ganglion cell in human primary open-angle glaucoma. Arch Ophthalmol. 115. 1031-1035
  • Wu, LY, Hinton, DR, Guo, L, Jiang, S, Wang, JT, Zeng, A. (2003). Microphtalmia resulting from MSX2-induced apoptosis in the optic vesicle. Invest Ophthalmol Vis Sci. 44. 2404-2412
  • Strömland, K, Pinazo-Duran, MD. (1994). Optic nerve hypoplasia: comparative effects in children and rats exposed to alcohol during pregnancy. Teratology. 50. 100-111
  • Pinazo-Duran, MD, Renau, J, Guerri, C, Strömland, K. (1997). Optic nerve hypoplasia in fetal alcohol syndrome: an update. Eur J Ophthalmol. 7. 262-270
  • Strömland, K, Pinazo-Duran, MD. (2002). Ophthalmic involvement in the fetal alcohol syndrome: clinical and animal model studies. Alcohol Alcohol. 37. 2-8
  • Pinazo-Duran, MD, Iborra, JF, Pons, S, Sevilla, E, Gallego-Pinazo, R, Muñoz, A. (2002). Postnatal thyroid hormone supplementation rescues developmental abnormalities induced by congenital-neonatal hypothyroidism in the rat retina. Ophthalmic Res. 37. 225-234
  • Melo, P, Rodrigues, LG, Pinazo-Duran, MD, Tavares, MA. (2005). Methamphetamine and lipid peroxidation in the rat retina. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol. 73. 455-460
  • Pinazo-Duran, MD, Cervera, R, Pons, S, Zanon, VC, Gallego-Pinazo, R, Guerri, C. (2005). Mecanismos de expresión proteica en el nervio óptico de la rata. Arch Soc Esp Oftalmol. 80. 99-104
  • Lowe, SW, Bodis, S, McClatchey,, Remington L, Ruley, HE, Fisher, DE. (1994). p53 status and the efficacy of cancer therapy in vivo. Science. 266. 807-810
  • Neufeld, AH, Sawada, A, Becker, B. (1999). Inhibition of nitric oxide synthase 2 by aminoguanidine provides neuroprotection of retinal ganglion cells in a rat miodel of chronic glaucoma. Proctl Natl Acad Sci USA. 96. 9944-9948
  • Wang, X, Zalcenstein, A, Oren, M. (2003). Nitric oxide promotes p53 nuclear retention and sensitizes neuroblastoma cells to apoptosis by ionizing radiation. Cell Death Differ. 10. 468-476
  • Forrester, K, Ambs, S, Lupold, SE, Kapust, RB, Spillare, EA, Weinberg, WC. (1996). Nitric oxide-induced p53 accumulation and regulation of inducible nitric oxide synthase expression by wild type p53. Proctl Natl Acad Sci USA. 93. 2442-2447