A genetic method for diagnosing lantana poisoning using a barcoding-based, genusspecific, polymerase chain reaction

Resumen

INTRODUCCIÓN: Las especies de Lantana son altamente tóxicas, ya que contienen lantadenos y otros compuestos químicos. Aunque ocasionalmente se han reportado envenenamientos en humanos, el ganado en todo el mundo a menudo es vícitima de intoxicaciones por esta planta, lo que representa una grave pérdida de ingresos en muchos países. A fin de reducir la tasa de mortalidad entre los animales envenenados por lantana, se requiere un diagnóstico precoz y fiable. Nuestro objetivo, por lo tanto, es el desarrollo de una prueba genética para determinar la presencia de Lantana Camara y otras especies comunes de lantana en el contenido del tubo digestivo y productos fecales de ganado. MATERIAL Y MÉTODOS: Se ha realizado una comparación entre las secuencias del Internal Transcribed Spacer 1, 2 y de la subunidad 5.8 del ADN ribosómico de Lantana Camara y el resto de las especies disponibles, en la base de datos NCBI de nucleótidos utilizando la herramienta BLAST. Como resultado, varios fragmentos de ADN, altamente específico para Lantana fueron identificados. Se diseñaron cebadores de PCR para hibridar en estas secuencias. Finalmente, se utilizó un par de cebadores universales a fin de lograr una banda constante para todas las angiospermas. RESULTADOS: Nuestro diseño de PCR multiplex genera una banda constante que certifica el correcto desarrollo de la PCR en todas las angiospermas probadas. Sin embargo, en el caso del ADN Lantana Camara, se genera una banda específica y más ligera, lo que permite la identificación positiva de esta especie. DISCUSIÓN: La nuestra es la primera prueba específica para confirmar la intoxicación por Lantana Camara reportado hasta la fecha, y puede proporcionar una herramienta útil a los servicios veterinarios en los países donde la intoxicación lantana en el ganado es frecuente.