Impacto del eje angiotensina-(1-7)/receptor 'Mas' en la inflamación y senescencia vasculares

Resumen

La angiotensina-(1-7) [Ang-(1-7)] es un heptapéptido del sistema renina angiotensina (SRA) generado a partir de la angiotensina (Ang) II y de la Ang I a través de diferentes rutas enzimáticas. La Ang-(1-7) se une al receptor metabotrópico Mas acoplado a proteína G y ha suscitado un creciente interés en los últimos años ya que se considera un antagonista fisiológico de la Ang II, pudiendo contrarrestar varias acciones deletéreas de esta última. En el presente trabajo de investigación, se determinó la capacidad de la Ang-(1-7) para disminuir en células vasculares humanas en cultivo las respuestas inflamatorias y senescentes, entendidas como procesos ligados al daño vascular. En células de músculo liso de aorta humana (CMLAH) se utilizó como marcador de inflamación la inducción de la sintasa de óxido nítrico inducible (iNOS) y la consiguiente liberación de NO, cuantificadas por Western blot y por el método de Griess, respectivamente. Se observó que la Ang-(1-7) redujo de manera dependiente de la concentración la inducción de iNOS estimulada tanto por Ang II (100 nM; 18 h) como por la citoquina proinflamatoria interleuquina IL-1beta (2,5 y 10 ng/ml; 18 h), entendida como una molécula inflamatoria independiente del SRA. El efecto inhibidor de la Ang-(1-7) (100 nM) se abolió en presencia de los antagonistas del receptor Mas A779 (1 µM) y D-Pro7-Ang-(1-7) (1 µM). Utilizando los fármacos inhibidores apocinina (30 µM) y tiocarbamato de pirrolidina (PDTC; 100 µM), se observó también que el efecto de la Ang-(1-7) dependía de la inhibición de la actividad de la enzima NADPH oxidasa y del factor de transcripción NF-kappaB estimuladas por Ang II y por IL-1beta. En células endoteliales de vena de cordón umbilical humano (HUVEC), se utilizó como marcador de inflamación la expresión de las moléculas de adhesión ICAM-1 y VCAM-1, que cumplen un papel importante en la adhesión de leucocitos ligada al desarrollo del proceso aterosclerótico. Mediante citometría de flujo e inmunofluorescencia indirecta, se determinó que la activación del eje Ang-(1-7)/receptor Mas era capaz de reducir la expresión de estas moléculas de adhesión estimuladas por Ang II e IL-1beta, posiblemente por un mecanismo que implicaba a la enzima NADPH. La senescencia vascular es una respuesta al estrés asociada con la ateroesclerosis y el daño vascular. En HUVEC, la Ang II y la IL-1beta indujeron un aumento de células senescentes, determinadas por tinción positiva a beta-galactosidasa (SA-betagal), y del daño telomérico celular, determinado por inmunofluorescencia, lo que fue revertido parcialmente por la Ang-(1-7) a través del receptor Mas. Se comparó el efecto de la Ang-(1-7) con el de la adipoquina visfatina, una adipoquina con actividad enzimática nicotinamida fosforribosil transferasa (Nampt) y cuyos niveles, contrariamente a los de Ang-(1-7), están aumentados en la obesidad. La visfatina (10-100 ng/ml; 24 h) incrementó la tinción de SA-betagal y el daño telomérico de manera dependiente de la concentración y del tiempo. Estos efectos de la visfatina (50 ng/ml; 24 h) se abolieron con el inhibidor de la Nampt APO866 (10 µM) y con apocinina (30 µM) indicando la participación de la NADPH oxidasa y de la Nampt en el efecto prosenescente de esta adipoquina. Este trabajo indica que el eje Ang-(1-7)/receptor Mas posee propiedades antiinflamatorias y antisenescentes que pueden contrarrestar no sólo la acción de la Ang II sino de otras moléculas independientes del SRA y con un papel importante en el daño vascular. En este sentido, el eje Ang-(1-7)/receptor Mas podría constituir una nueva diana farmacológica para modular la inflamación y senescencia vascular.