Estudio de los perfiles de expresión de micrornas en líneas celulares de cancer de mama triple negativo tratadas con doxorubicinaimplicación de la familia mir-449

Resumen

Entre los diferentes subtipos de cáncer de mama se encuentra el triple negativo, denominado así porque las células tumorales de este subtipo presentan baja expresión o carecen de receptores de estrógenos, receptores de progesterona, y receptores del factor de crecimiento epidérmico tipo II (HER2). Actualmente no existe una diana específica para el tratamiento de este tipo de cáncer de mama, caracterizado por ser muy agresivo, presentar alto riesgo de metástasis, un alto índice de recurrencia, y una bajo índice de supervivencia. Debido a la falta de dianas moleculares específicas, el tratamiento comúnmente utilizado es la quimioterapia. Dentro de los diferentes agentes quimioterápicos, se encuentra la doxorubicina, una antraciclina que produce disrupción del DNA y muerte celular. Sin embrago, un gran porcentaje de las pacientes triple negativas tratadas con antraciclinas presentan enfermedad residual en los tres años posteriores al tratamiento, además de un incremento en el riesgo de mortalidad. Los mecanismos de quimiosensibilidad y quimioresistencia a la doxorubicina todavía no están claros, por lo que el estudio de las vías de regulación y posibles dianas específicas podría optimizar la respuesta a este tratamiento. En este sentido, los microRNAs (miRNAs) surgen como un nuevo peldaño de regulación del cáncer y respuesta a tratamiento. En este trabajo de investigación analizamos los niveles de expresión de miRNAs en líneas celulares de cáncer de mama con subtipo molecular triple negativo (MDA-MB-231 y MDA-MB-468) y luminal A (MCF-7), tras el tratamiento con doxorubicina. Los resultados nos permiten establecer grupos de miRNAs que cambian tras el tratamiento y que pueden predecir una respuesta diferencial al fármaco. Además, mediante herramientas bioinformáticas, estudiamos la posible interacción entre los miRNAs y sus potenciales dianas. Finalmente nos centramos en la línea celular triple negativa MDA-MB-231 y en la familia de miRNAs-449, puesto que todos sus miembros se sobre-expresan tras el tratamiento. De manera paralela trabajamos con una línea celular triple negativa resistente a doxorubicina (MDA-MB-231R) donde medimos la expresión tanto de la familia de miRNAs-449 como de sus dianas, y encontramos diferencias significativas respecto de las líneas triples negativas sensibles al fármaco. Las pruebas funcionales (tanto de sobreexpresión como de inhibición de esos microRNAs) demuestran que esta familia regula vías de respuesta al fármaco relacionadas con apoptosis y/o ciclo celular a través de la interacción con sus dianas génicas. Por otra parte, realizamos estudios de viabilidad y ciclo celular, con el objetivo de analizar el posible papel de estos miRNAs en la respuesta a la doxorubicina a través de la des-regulación del ciclo celular. Además medimos la expresión de esta familia de miRNAs y de sus dianas en pacientes de cáncer de mama triple negativo tratadas con antraciclinas. En conjunto, los resultados obtenidos indican que esta familia de miRNAs puede mediar, al menos en parte, la respuesta al fármaco, y que su sobre- o infra- expresión conducen a cambios en la sensibilidad o la resistencia al tratamiento respectivamente.