Utilización de micrornas como dianas terapéuticas en distrofia miotónica

Resumen

La distrofia miotónica tipo 1 (DM1) se debe a una expansión del triplete CTG en 3´UTR del gen DMPK, mientras que, la distrofia miotónica tipo 2 (DM2) se origina por la de la repetición CCTG en el intrón 1 del gen CNBP. Son dos enfermedades multisistémicas con manifestaciones patológicas en músculo esquelético (miotonia, degeneración y debilidad muscular), corazón (defectos en la conducción cardiaca) y sistema nervioso central. Los transcritos DMPK y CNBP mutantes se pliegan en horquillas que secuestran factores de splicing alternativo, principalmente Muscleblind-like 1 (MBNL1; y su parálogo MBNL2). La falta de la proteínas MBNL origina problemas en el splicing de transcritos musculares y conduce a la miopatía en ratones knock out para estos genes. Mientras que la sobreexpresión de MBNL1 en músculo esquelético de ratones HSALR modelo de DM1, suprime fenotipos típicos de DM1 tales como alteraciones en el splicing alternativo, miotonía y secuestro de MBNL1 en foci ribonucleares. A pesar del intenso trabajo de investigación de la última década, que ha aclarado muchos aspectos del mecanismo de fisiopatogénesis de la DM y ha permitido experimentar con tratamientos potenciales, no se ha transferido a la práctica clínica una terapia efectiva para la enfermedad. Una nueva aproximación terapéutica desarrollada en esta tesis y avalada por nuestros resultados en modelos animales en Drosophila y ratón HSALR DM1 y mioblastos de pacientes de DM1, es potenciar la expresión endógena de MBNLs mediante el silenciamiento de microRNAs represores de su expresión para así compensar su secuestro y mejorar algunos de los fenotipos característicos de la enfermedad como son la espliceopatía o la miopatía. En el caso de Drosophila la desrepresión de Muscleblind provocada por el silenciamiento de dme-miR-277 y dme-miR-304 en moscas modelo de la enfermedad, es suficiente para rescatar de forma significativa diferentes eventos de splicing alterados en DM1 y características funcionales tan importantes como la capacidad de vuelo y la vida media. Esta aproximación terapéutica también puede ser testada en un nuevo modelo de DM2 en Drosophila generando dentro del marco de esta tesis. Por otro lado, el silenciamiento de miR-23b y miR-218 mediado por antagomiRs en mioblastos DM1 y ratones HSALR desencadena un aumento de los niveles de las proteínas MBNL1/2 rescatando eventos de splicing típicamente alterados en la patología y mejora fenotipos musculares típicos de la enfermedad.