Regulación por estradiol de la producción de angiotensina 1-7 y papel de su receptor mas en la producción de óxido nítrico en células endoteliales humanas

Resumen

El sistema renina-angiotensina intracelular (SRA) está formado por un conjunto de enzimas y metabolitos que se han relacionado con la regulación de la función cardiovascular y con la fisiopatología de la hipertensión arterial. El SRA clásico o circulante interviene en la regulación vascular principalmente con los péptidos bioactivos angiotensina (Ang) I y Ang II. La enzima que regula el paso de Ang I a Ang II es la enzima de conversión de la angiotensina 1 (ECA-1, la primera que se describió). En el año 2000 se descubrió que la enzima de conversión de la angiotensina 2 (ECA-2) convertía la Ang II en Ang 1-7. La Ang 1-7 es una molécula del SRA que tiene efecto fundamentalmente vasodilatador. Entre otras acciones, la Ang 1-7 actuando a través del receptor específico Mas, incrementa la producción de óxido nítrico (NO), a través de la activación de la óxido nítrico sintasa endotelial (eNOS) mediante una cascada de fosforilaciones. En humanos, el 17β-estradiol (E2) es el más abundante de los estrógenos. Las concentraciones plasmáticas de E2 en las mujeres están en el rango de 0,1-1 nM, aunque son variables según la etapa fisiológica en la que se encuentre la mujer. El E2 ejerce sus acciones a través de sus receptores de estrógenos (RE), Tres proteínas ha sido identificada como mediadoras de los efectos estrogénicos: los receptores estrogénicos α (REα), β (REβ) y unido a proteína G (GPER). Los dos primeros, en el modelo clásico o “genómico”, al unir la hormona son capaces de activar la transcripción de genes que participan en el control del funcionamiento celular. La modulación del SRA local o intracelular endotelial por 17β-estradiol (E2) es el objetivo general de esta tesis. En concreto, investigamos por un lado el efecto del E2 sobre la expresión y actividad de las ECA-1 y ECA-2, su repercusión en la producción de Ang 1-7 y el papel de los receptores de estrógenos y, por otro, el papel de Ang 1-7 y su receptor Mas en la estimulación por E2 de la producción de NO, todo ello en cultivos de células endoteliales de vena umbilical humana (HUVEC). Nuestros resultados muestran que las concentraciones fisiológicas de E2 indujeron un aumento dependiente de concentración de la expresión de ECA-1 y ECA-2. Estos efectos fueron mediados por la activación de REα, ya que los antagonistas de RE ICI 182780 (inespecífico) y MPP (específico para REα) abolieron completamente el efecto de E2. Además, el agonista de REα, PPT, reprodujo los efectos de E2 en la expresión y actividad de la proteína ECA-1 y ECA-2. La exposición de las células endoteliales a E2 aumentó significativamente la producción de Ang 1-7. Se comprobó que el E2 estimulaba la producción endotelial de NO a través de la activación de REα, ya que los antagonistas de RE, ICI 182780 y MPP, abolieron completamente el efecto de E2. La Ang 1-7 estimuló la producción endotelial de NO a través de su receptor Mas, ya que su antagonista el A779 bloqueó completamente este efecto. Asimismo, este antagonista del receptor Mas de Ang 1-7 también bloqueó la producción de NO estimulado por E2, demostrando la participación del receptor Mas en la producción de NO estimulada por E2 en HUVEC. En conclusión, el E2 aumenta la producción de Ang 1-7, a través de REα, implicando una mayor expresión y actividad de ECA-1 y ECA-2. Asimismo, el receptor Mas media la producción de NO estimulada por Ang 1-7 y también por E2.