Produccion aislamiento e identificacion de una sustancia antibiotica segregada por penicillium capsulatum

Resumen

SE AISLA DE LOS CULTIVOS DE PENICILLIUM CAPSULATUM UNA SUSTANCIA ACTIVA QUE TIENE PROPIEDADES BACTERICIDAS FRENTE: KLEBSIELLA PNEUMONIAE PROTEUS MIRABILIS E.COLI CITROBACTER FREUNDII; SERRATIA LIQUEFACIENS ENTEROBACTER AEROGENES PSEUDOMONAS AERUGINOSA SALMONELLA ENTERITIDIS ACINETOBACTER SPP MYCOPLASMA MELEAGRIDIS STAPHYLOCOCCUS AUREUS YERSINIA SPP Y SHIGELLA SPP. LAS CONDICIONESOPTIMAS DE CULTIVO SE OBTIENEN CUANDO SE SIEMBRA EL P. CAPSULATUM EN EL ANTIBIOTIC TEST BROTH Y PATATA-DEXTROSA A PH 4.5. EN ESTAS CONDICIONES EL PROCESO DE FERMENTACION TIENE TRES FASES: PRE-CRECIMIENTO CRECIMIENTO Y PRODUCCION. SE ENSAYA EL PODER FUNGICIDA DE DICHA SUSTANCIA ACTIVA Y SE VE QUE CARECE DE DICHO PODER. PARA ASILAR LA SUSTANCIA ACTIVA DEL EXTRATO BRUTO SE FRACCIONA ESTE POR CROMOTOGRAFIA DE COLUMNA UTILIZANDO DICLOROMETANO ACETONA Y METANOL EN DISTINTAS PROPORCIONES COMO ELUYENTES SE OBTIENEN ASI 6 FRACCIONES QUE SOMETIDAS A ENSAYOS DE ACTIVIDAD SOLO UNA ES ACTIVA LA ELUIDA CON LA MEZCLA DICLOROMETANO/ACETONA 95:5. ESTA FRACCION SE PURIFICA POR HPLC USANDO COMO FASE MOVIL LA MEZCLA DICLOROMETANO/ACETATO DE ETILO 95:5 Y UNA COLUMNA DE U-PORASIL Y COMO DETECTOR DE UV. ASI SE OBTIENEN 4 SUBFRACCIONES DE LAS QUE SOLOUNA PRESENTA ACTIVIDAD Y CORRESPONDE A UN PRODUCTO PURO OPALESCENTE CUYO ANALISIS DE COMPOSICION CENTESIMAL DA UNA FORMULA EMPIRICA DE C SUB 9 H SUB 10 O SUB 4 CON 5 INSATURACIONES. EL ESPECTRO DE IR NOS INDICA LA PRESENCIA DE GRUPOS CARBONILO DE LACTONA DE 4 O 5 CARBONOS Y LA PRESENCIA DE UN DOBLE ENLACE. EL ESPECTRO DE RMN DE H INDICA LA PRESENCIA DE PROTONES OLEFINICOS ALIFATICOS UNIDOS A OXIGENO Y ALIFATICOS NO UNIDOS A GRUPOS ELECTRONEGATICOS. EL ESPECTRO DE RMN DE 13C CONFIRMA LA PRESENCIA DE 9 CARBONOS DOS DE ELLOS CARBONILICOS DOS OLEFINICOS DOS UNIDOS A OXIGENO Y TRES SEÑALES QUE CORRESPONDEN A CH CH SUB 2 Y CH SUB 3. EL ESPECTRO DE MASAS NO DA PICO CORRESPONDIENTE AL ION MOLECULAR PERO PROPORCIONA FRAG