Sintesis y excrecion de proteinas plasmaticas por hepatocitos de rata adulta cultivados en un medio quimicamente definido. Regulacion por dexametasona y aminoacidos ramificados

Abstract

EN LOS ANIMALES SUPERIORES LA BIOSINTESIS Y EXCRECION DE PROTEINAS PLASMATICAS ES UNA DE LAS FUNCIONES MAS ESPECIALIZADAS DEL HIGADO Y SE REALIZA EN LAS CELULAS PARENQUIMALES DE ESTE ORGANO: LOS HEPATOCITOS. EN LA PRESENTE TESIS SE HA ABORDADO EL ESTUDIO IN VITRO DE ESTA FUNCION UTILIZANDO EL MODELO EXPERIMENTAL DE CULTIVO PRIMARIO DE HEPATOCITOS DE RATA ADULTA EN UN MEDIO QUIMICAMENTE DEFINIDO. LOS OBJETIVOS PROPUESTOS HAN SIDO: 1) LA CARACTERIZACION DEL PROPIO MODELO DESDE EL PUNTO DE VISTA DE LA SINTESIS Y EXCRECION DE PROTEINAS PLASMATICAS. 2) EL ESTUDIO DEL PAPEL REGULADOR DE LA DEXAMETASONA SOBRE ESTA FUNCION. 3) EL ESTUDIO DEL POSIBLE PAPEL REGULADOR DE LOS AMINOACIDOS RAMIFICADOS (AAR). PARA ELLO HA SIDO NECESARIO PURIFICAR Y PONER A PUNTO METODOS DE MEDIDA DE ALTA SENSIBILIDAD (ELISA E INMUNOPRECIPITACION DE PROTEINAS MARCADAS RADIOACTIVAMENTE) PARA LA DETERMINACION DE 5 PROTEINAS PLASMATICAS DE RATA: ALBUMINA TRANSFERRINA FIBRINOGENO BETA1-GLICOPROTEINA Y ALPHA2-GLOBULINA. LOS RESULTADOS OBTNIDOS INDICAN QUE: 1) EN CONDICIONES BASALES LOS HEPATOCITOS SINTETIZAN PROTEINAS PLASMATICAS Y LAS EXCRETAN AL MEDIO EXTRACELULAR. EN EL SEGUNDO DIA DECULTIVO LA PRODUCCION DE ALBUMINA Y TRANSFERRINA ES MENOR QUE LA DESCRITA IN VIVO MIENTRAS QUE LA PRODUCCION DE FIBRINOGENO ES SIMILAR A IN VIVO . 2) LA DEXAMETASONA A CONCENTRACIONES FISIOLOGICAS ESTIMULA LA SINTESIS DE PROTEINAS PLASMATICAS TOTALES ALBUMINA Y TRANSFERRINA A CORTO Y A LARGO PLAZO.3) LOS AAR ESTIMULAN LA SINTESIS DE ALBUMINA TRANSFERRINA BETA1-GLICOPROTEINA ALPHA2-GLOBULINA. LAS CONCENTRACIONES DE MAXIMO EFECTO COINCIDEN CON LAS QUE SE ALCANZAN EN SANGRE PORTAL DE RATA TRAS UNA INGESTA RICA EN PROTEINAS. EL EFECTO DE LOS AAR ES ESPECIFICO SOBRE LAS PROTEINAS PLASMATICAS MIENTRAS QUE LA SINTESIS DE PROTEINAS ESTRUCTURALES NO SE VE AFECTADA.