El sistema de biotransformacion de xenobioticos en hepatocitos humanos y de rata en cultivo

Resumen

LA CARACTERIZACION DEL SISTEMA DE BIOTRANSFORMACION DE XENOBIOTICOS EN HEPATOCITOS DE RATA EN CULTIVO PRIMARIO PONE DE MANIFIESTO QUE LAS ENZIMAS DE LA FASE I, Y CONCRETAMENTE LAS MONOOXIGENASAS DEPENDIENTES DEL CITOCROMO P-450, EXPERIMENTAN UNA RAPIDA DISMINUCION EN SU ACTIVIDAD BASAL DURANTE LOS PRIMEROS DIAS DE CULTIVO, MIENTRAS QUE LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS DE LA FASE II PERMANECE ESTABLE, AL MENOS DURANTE EL PERIODO DE CULTIVO ESTUDIADO. ASI MISMO, LA RESPUESTA DE LOS HEPATOCITOS CULTIVADOS, A LA ACCION DE CONOCIDOS AGENTES INDUCTORES, ES SIMILAR A LA QUE SE OBSERVA IN VIVO. CON OBJETO DE SELECCIONAR LAS CONDICIONES DE CULTIVO QUE FAVOREZCAN UNA CONSERVACION MAS PROLONGADA DE LA ACTIVIDAD DEL SISTEMA HEPATICO DE METABOLIZACION DE XENOBIOTICOS, SE HA ANALIZADO LA INFLUENCIA DE LA COMPOSICION QUIMICA DEL MEDIO DE CULTIVO, LA NATURALEZA DEL BIOSOPORTE PARA EL CULTIVO Y EL COCULTIVO CON OTRAS CELULAS, SOBRE LA ESTABILIDAD DE ESTA FUNCION HEPATICA. EN ESTE SENTIDO, LA MODIFICACION DE LA COMPOSICION DEL MEDIO ESTANDAR DE CULTIVO MEJORA DE FORMA TEMPORAL EL MANTENIMIENTO DE ALGUNOS COMPONENTES DEL SISTEMA DE BIOTRANSFORMACION, MIENTRAS QUE LA SUSTITUCION DEL SOPORTE HABITUAL DE CULTIVO (FIBRONECTINA) POR OTRO DE NATURALEZA BIOQUIMICA MAS COMPLEJA (BIOMATRIZ EXTRACELULAR DE CELULOSAS ENDOTELIALES) NO PRODUCE NINGUN CAMBIO. POR EL CONTRARIO, LOS COCULTIVOS CON LINEAS CELULARES CONTINUAS PROLONGAN CONSIDERABLEMENTE LA CONSERVACION DE ESTA FUNCION, SIN MODIFICAR LA RESPUESTA DE LOS HEPATOCITOS DE RATA A LOS AGENTES INDUCTORES. POR ULTIMO, EL ESTUDIO CON CELULAS HUMANAS NOS HA PERMITIDO COMPROBAR QUE LOS HEPATICOS HUMANOS EN CULTIVO PRIMARIO EXPRESAN LAS ACTIVIDADES ENZIMATICAS DE LAS FASES I Y II CARACTERISTICAS DEL HIGADO ADULTO, Y SON CAPACES DE RESPONDER A LA INDUCCION IN VITRO PRODUCIDA POR XENOBIOTICOS. LA ESTABILIDAD DE LAS ENZIMAS DE BIOTRANSFORMACION ES MAYOR QUE LA OBSERVADA PARA LOS HEPATOCITOS DE RATA, LO QUE EVIDENCIA