Amplificacion de dna de mycobacterium tuberculosis por pcr (polymerase chain reaction) utilidad en el diagnostico de la tuberculosis pulmonar y pleural

Resumen

PARA DETECTAR GENOMA DE MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS, HEMOS DISEÑADO UN PROTOCOLO DE PCR (POLYMERASE CHAIN REACTION) QUE AMPLIFICA UN FRAGMENTO DE 123 PARES DE BASES PERTENECIENTES A LA SECUENCIA DE INSERCION IS6110, ESPECIFICA DE M. TUBERCULOSIS COMPLEX. PROCEDIMOS A LA OPTIMIZACION DEL METODO, VALORANDO DIVERSOS METODOS DE EXTRACCION DE DNA DE LAS MUESTRAS CLINICAS, COMPARANDO LA SENSIBILIDAD Y ESPECIFICIDAD DE DOS PARES DE INICIADORES QUE AMPLIFICAN SECUENCIAS GENOMICAS DIFERENTES (GEN GROEL/IS6110), Y EVALUANDO CUAL ERA LA COMPOSICION IDONEA DE LA MEZCLA DE AMPLIFICACION Y LAS CARACTERISTICAS DE LOS CICLOS DE AMPLIFICACION. ESTUDIAMOS 304 MUESTRAS CLINICAS (ESPUTOS Y LIQUIDOS PLEURALES), PERTENECIENTES A 232 PACIENTES. COMPARAMOS LOS RESULTADOS DE LA PCR CON EL DIAGNOSTICO CLINICO Y CON LOS RESULTADOS OBTENIDOS MEDIANTE LA TINCION DE ZIEHL-NEELSEN Y EL CULTIVO EN MEDIO DE LOWENSTEIN-JENSEN. LA SENSIBILIDAD DE LA PCR FUE DEL 97,6% COMPARADO CON EL DIAGNOSTICO CLINICO Y DEL 100% SI TOMAMOS COMO REFERENCIA EL CULTIVO, PARA LA TUBERCULOSIS PULMONAR; Y DEL 81% Y 100% PARA EL DIAGNOSTICO DE LA TUBERCULOSIS PLEURAL, RESPECTIVAMENTE. LA ESPECIFICIDAD EN AMBOS CASOS FUE DEL 100%.