Caracterizacion molecular del antigeno goodpasture

Résumé

EL SINDROME DE GOODPASTURE (GP) ES UNA ENFERMEDAD AUTOINMUNE QUE CURSA CON GLOMERULONEFRITIS, HEMORRAGIA PULMONAR Y FORMACION DE ANTICUERPOS ANTI-MEMBRANA BASAL GLOMERULAR. EL ANTIGENO GP SE HA IDENTIFICADO COMO EL DOMINIO NC1 DE LA CADENA ALFA 3 DEL COLAGENO IV (SAUS, J. ET AL 1988. J. BIOL. CHEM. 263, 13374). EN ESTE TRABAJO HEMOS DETERMINADO LA SECUENCIA Y LA ESTRUCTURA EXONICA DE 285 AMINOACIDOS DE LA CADENA ALFA 3 (IV) HUMANA, QUE COMPRENDEN 53 AMINOACIDOS DEL DOMINIO DE TRIPLE HELICE Y EL DOMINIO NC1 COMPLETO (232 AMINOACIDOS), ASI COMO LA SECUENCIA DE 753 AMINOACIDOS DE LA CADENA ALFA 3 (IV) BOVINA. A PARTIR DE LA COMPARACION DE LA ESTRUCTURA PRIMARIA DE LOS DOMINIOS NC1 DE LAS CADENAS HUMANAS ALFA 1(IV), ALFA 2(IV), ALFA 3(IV) Y ALFA 5(IV) HEMOS CONSTRUIDOS UN ARBOL FILOGENETICO QUE ES COHERENTE CON LAS CORRESPONDIENTES ESTRUCTURAS EXONICAS Y QUE Y QUE INDICA QUE ALFA 2 (IV) FUE EL PRIMER GEN EN DIVERGIR, SEGUIDO DE ALFA 3(IV), MIENTRAS QUE ALFA 1 (IV) Y ALFA 5(IV) DIVERGIERON LOS ULTIMOS Y, POR ELLO, SON LOS MAS RELACIONADOS EL ANALISIS DE LA ESTRUCTURA PRIMARIA DE ALFA 3(IV) NOS HA PERMITIDO LA IDENTIFICACION DE UNA REGION DE 18 AMINOACIDOS EN EL EXTREMO AMINO-TERMINAL DEL ANTIGENO GP, DIVERGENTE RESPECTO A SU HOMOLOGA BOVINA Y OTRAS CADENAS ALFA HUMANAS, QUE ES POTENCIALMENTE CAPAZ DE FORMAR PARTE DEL EPITOPO GP, DE PROMOVER LA UNION DEL AUTOANTIGENO A CELULAS Y DE FOSFORILARSE EN SERINAS. SE HAN IDENTIFICADO Y CARACTERIZADO, MEDIANTE CLONADO MOLECULAR, CINCO MRNAS DIFERENTES QUE SE ORIGINAN A PARTIR DEL GEN ALFA 3(IV) HUMANO MEDIANTE UN PROCESAMIENTO ALTERNATIVO DEL RNA PRECURSOR (PRE-MRNA). LAS SECUENCIAS DE AMINOACIDOS DE LAS FORMAS VARIANTES DEL MRNA SON IDENTICAS Y SIGNIFICATIVAMENTE MAS CORTAS QUE LA SECUENCIA CORRESPONDIENTE AL ANTIGENO GP COMPLETO. HEMOS POSTULADO QUE EL FENOMENO DE PROCESAMIENTO ALTERNATIVO DEL PRE-MRNA DEL ANTIGENO GP PUEDE TRATARSE DE UNA FORMA FISIOLOGICA DE REGULAR LA FOSFORILACION Y