Estructura de cromatina del gen fbp1 de saccharomyces cerevisiae

Abstract

EN ESTE TRABAJO SE HA LLEVADO A CABO UN ESTUDIO DE LA ESTRUCTURA DE LA CROMATINA DE ESTE GEN MEDIANTE DIGESTIONES CON NUCLEASAS Y RETICULACION DEL DNA "IN VIVO" CON PSORALENOS. HEMOS ENCONTRADO UNA REGION HIPERSENSIBLE A DNASA I EN EL PROMOTOR ENTRE LAS POSICIONES -540 Y -400 QUE SE EXTIENDE HACIA EL GEN EN ESTADO DESREPRIMIDO. LA RETICULACION DEL DNA CON PSORALENOS HA REVELADO TAMBIEN QUE PARTE DEL PROMOTOR ESTA LIBRE DE NUCLEOSOMAS. ESTOS RESULTADOS JUNTO CON LOS DERIVADOS DE LAS DIGESTIONES CON MNASA HAN PERMITIDO PROPONER LA EXISTENCIA DE UNA REGION UAS ENTRE -540 Y -340. EN EL FLANCO 3' DEL GEN SE HA ENCONTRADO UN FUERTE SITIO HIPERSENSIBLE CONSTITUTIVO A DNASA I, MNASA, NUCLEASA S1 Y NUCLEASAS ENDOGENAS, LOCALIZADO EN POSICION 1130. EN ESTADO REPRIMIDO EXISTEN NUCLEOSOMAS POSICIONADOS A LOS DOS LADOS DE ESTE SITIO; COMO CONSECUENCIA DE LA DESREPRESION TIENEN LUGAR CAMBIOS EN ESTA ORGANIZACION NUCLEOSOMAL. SE HA COMPROBADO MEDIANTE DIGESTIONES CON LA ENDONUCLEASA VII DEL FAGO T4 QUE EN DNA DESNUDO EXISTE EN ESTA POSICION UN CRUCIFORME EN UN CIERTO NUMERO DE MOLECULAS. ADEMAS, TAMBIEN EN LEVADURA "IN VIVO" SE DETECTA SENSIBILIDAD A ESTA ENDONUCLEASA EN LA MISMA POSICION POR LO CUAL TAMBIEN EN ESTAS CONDICIONES EXISTE EL CRUCIFORME. SU CERCANIA CON EL FINAL DEL MRNA (1156) PODRIA INDICAR UNA FUNCION DEL CRUCIFORME EN LA TERMINACION DE LA TRANSCRIPCION.