Estudio in vitro del sarcoma de celulas indiferenciadas de hueso tipo ewing tras el estimulo con factores de diferenciacion. Analisis morfologico, inmunocitoquimico y de biologia molecular

Resumen

HEMOS DESARROLLADO UN MODELO EXPERIMENTAL DINAMICO DE DIFERENCIACION NEURAL Y DE REVERSION DE DICHA DIFERENCIACION, APLICADO A LOS SARCOMAS TIPO EWING EN CULTIVO CELULAR. LA INDUCCION DE LA DIFERENCIACION NEURAL HA SIDO REALIZADA POR TRES PROCEDIMIENTOS: DEPLECCION SERICA, UTILIZACION DE DIBUTIRIL AMPC Y DE ACIDO RETINOICO. LA REVERSION DE DICHA DIFERENCIACION HA SIDO OBTENIDA POR LA ACCION DEL ESTER DEL FORBOL (PMA). EN NUESTRO TRABAJO HEMOS UTILIZADO CUATRO LINEAS CELULARES CONTINUAS DE SARCOMA DE EWING. COMO CONTROL POSITIVO SE HA UTILIZADO UNA LINEA DE NEUROBLASTOMA Y COMO CONTROL NEGATIVO OTRA DE OSTEOSARCOMA. LOS CAMBIOS CELULARES HAN SIDO ANALIZADOS POR MICROSCOPIA OPTICA POR CONTRASTE DE FASES, MICROSCOPIA ELECTRONICA DE TRANSMISION, INMUNOCITOQUIMICA Y TECNICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR, OBSERVANDO QUE LAS LINEAS DEL SARCOMA DE EWING EMPLEADAS POSEEN UN VARIABLE FENOTIPO NEURAL, CON DIVERSA CAPACIDAD DE RESPUESTA BIOLOGICA INDUCIBLE MODIFICANDO EL MEDIO DE CULTIVO CON DISTINTOS AGENTES DE DIFERENCIACION, AUNQUE ELLO NO VARIA LA EXPRESION DE LOS ONCOGENES N-MYC, C-MYC Y DBL.