Actividad de linfocitos t citotoxicos frente a la proteina vp7 de rotavirus

Résumé

LOS LINFOCITOS T CITOTOXICOS (LTCS) INTERVIENEN COMO MECANISMO INMUNITARIO PROTECTOR EN LAS INFECCIONES POR ROTAVIRUS, RECONOCIENDO PREFERENTEMENTE LA GLICOPROTEINA VP7 DE LA CAPSIDE EXTERNA DEL VIRUS (OFFIT Y DUDZIK, 1988; OFFIT ET AL. 1991). CON EL OBJETO DE IDENTIFICAR LOS EPITOPOS RECONOCIDOS POR LTCS DE RATONES INMUNIZADOS CON CEPAS DE ROTAVIRUS HOMOLOGOS (EDIM) Y HETEROLOGOS (SA11) SE HA CLONADO EL GEN 9 DE LA CEPA SA11 DE ROTAVIRUS, QUE CODIFICA LA PROTEINA VP7, EN VIRUS VACUNA (VV). SU EXPRESION SE HA DEMOSTRADO POR INMUNOFLUORESCENCIA, INMUNOTRANSFERENCIA Y RADIOINMUNOPRECIPITACION. ASIMISMO SE HAN CONSTRUIDO VV RECOMBINANTES QUE EXPRESAN MOLECULAS VP7 TRUNCADAS, CONSTITUIDAS POR 88 AMINOACIDOS DEL EXTREMO AMINO-TERMINAL. LA APLICACION DE ESTOS VV RECOMBINANTES EN ENSAYOS DE CITOTOXICIDAD IN VITRO, ASI COMO DE PEPTIDOS SINTETIZADOS ATENDIENDO A LA SECUENCIA DE ESTA REGION DE LA PROTEINA VP7, HA PERMITIDO DEMOSTRAR QUE LOS ESPLENOCITOS GENERADOS EN RATONES BALB/C (H-2D) Y C57BL/6 (H-2B), INFECTADOS TANTO CON ROTAVIRUS SA11 COMO CON ROTAVIRUS EDIM, RECONOCEN Y LISAN CELULAS DIANA QUE EXPRESAN VP7, TANTO LA MOLECULA COMPLETA COMO TRUNCADA. SE HA CARACTERIZADO UN EPITOPO KB Y OTRO EPITOPO KD QUE DETERMINAN RESPUESTAS CITOTOXICAS INTENSAS POR PARTE DE LOS LTCS ESPECIFICOS DE ROTAVIRUS. AMBOS EPITOPOS SE LOCALIZAN EN LA REGION HIDROFOBA H1, SECUENCIA SEÑAL DE LA PROTEINA VP7.