Localizacion inmunohistoquimica y factores endometriales que regulan la secrecion de la interleuquina-1 (il-1) durante el desarrollo preimplantatorio del embrion humano

Résumé

INTRODUCCION: EL SISTEMA DE LA IL-1 ESTA FORMADO POR DOS RECEPTORES, EL IL-1RTI Y EL IL-1RTII QUE PERTENECEN A LA FAMILIA DE LAS INMUNOGLOBULINAS, CON SUS RESPECTIVOS FRAGMENTOS SOLUBLES. COMO LIGANDOS PRESENTA DOS AGONISTAS, LA IL-1ALFA Y EL IL-1BETA, CUYA RESPUESTA ES ANTAGONIZADA POR SU ANTAGONISTA NATURAL, EL IL-1RA. EL ESTUDIO DE DICHO SISTEMA EN LA IMPLANTACION EN EL RATON, HA PERMITIDO DEMOSTRAR SU IMPORTANCIA EN ESTE PROCESO. OBJETIVOS: 1. DETERMINAR LA PRESENCIA DE DICHO SISTEMA EN EL EMBRION PREIMPLANTATORIO HUMANO, 2. COMPROBAR LA SECRECION AL MEDIO DE CULTIVO, 3. INDAGAR SOBRE LOS FACTORES ENDOMETRIALES QUE PUDIERAN INFLUIR EN LA SECRECION DE DICHO SISTEMA POR LOS PREEMBRIONES HUMANOS, 4. PRESENTAR EL PERFIL DE SECRECION DE DICHO SISTEMA POR UN EMBRION QUE LOGRARA IMPLANTAR DE FORMA NORMAL. MATERIALES Y METODOS: SE ANALIZARON POR INMUNOHISTOQUIMICA 44 OVOCITOS NO FECUNDADOS Y 78 EMBRIONES QUE QUEDARON BLOQUEADOS DURANTE SU DESARROLLO HASTA BLASTOCISTO PARA SU CONGELACION. TANTO OVOCITOS COMO EMBRIONES SE OBTUVIERON TRAS EL CONSENTIMIENTO DE DONACION FIRMADO POR LAS PACIENTES. SE CULTIVARON 53 EMBRIONES EN MEDIOS CONVENCIONALES DE FECUNDACION IN VITRO (FIV), 20 EN MENEZO B2 Y 33 EN HAM F-10, QUE SE GUARDABAN PARA DETERMINAR POR ELISA LA PRESENCIA DE DICHO SISTEMA EN LOS MEDIOS DE CULTIVO. SE COCULTIVARON 24 EMBRIONES EN PRESENCIA DE CELULAS EPITELIALES ENDOMETRIALES Y 4 EN PRESENCIA DE CELULAS DEL ESTROMA ENDOMETRIAL, LOS MEDIO TAMBIEN SE GUARDABAN PARA DETERMINAR POR ELISA LA PRESENCIA EN LOS MEDIO DEL SISTEMA DE LA IL-1, Y POR ULTIMO SE CULTIVARON 9 EMBRIONES EN MEDIO CONDICIONADO DE CELULAS EPITELIALES ENDOMETRIALES PARA CORROBORAR QUE LO QUE MEDIAMOS PROCEDIA EN REALIDAD DE LOS EMBRIONES INFLUENCIADO POR FACTORES SOLUBLES SECRETADOS POR LAS CELULAS EPITELIALES DEL ENDOMETRIO. RESULTADOS: LOS EXPERIMENTOS DE INMUNOHISTOQUIMICA PERMITIERON DETECTAR A NIVEL DE PROTEINA INMUNORREACTIVA LA PRESENCIA DE LOS PR