Estudio de la respuesta del estrés en levaduras vinicas

Resumen

El estrés celular en levadura se define como aquellas condiciones que no son optimas para el crecimiento. Durante el proceso de su producción industrial y durante la fermentacion vinica, las levaduras se ven sometidas a una sucesion de condiciones de estrés. En esta tesis se ha abordado el estudio y la mejora de la resistencia a estrés en levaduras vinicas. En primer lugar sehan explorado algunos aspectos basicos de la respuesta molecular al estrés. Asi, se han estudiado la respuesta al estrés por agotamiento de fuentes nitrogeadas durante la fermentacion vinica, situacion que provoca con frecuencia paradas en vinificacion. La actividad del enzima arginasa ha resultado un buen indicador de la disponibilidad intracelular de nitrogeno durante este proceso biotecnologico. El protocolo de determinacion de esta actividad es de una sencillez notable en comparacion con los metodos disponibles actualmente para la deteccion temprana de deficiencias de nitrogeno en vinificacion. Por otro lado, la determinacion de esta actividad puede servir para comprobar ele fecto de agentes como el etanol en la disponibilidad intracelular de nitrogeno. Se ha analizado el papel del gen UTH4 en la resistencia a estrés. Los niveles de expresion de este gen correlacionan con la resistencia a estrés y con los niveles de expresion de los genes HSP12, SSA3 y HSP82. Los efectos de UTH4 en dichos niveles no tiene lugar mediante rutas de activacion transcripcional independientes a los factores transcripcionales ya caracterizados, sino que probablemente se deben a mecanismos de regulación postranscripcional. Ademas UTH4 participa en la respuesta a estrés oxidativo de forma independiente a los factores transcripcionales Msn2,4p y Yap1p. Se ha abordado tambien la mejora de la resistencia a estrés en levaduras vinicas. Por un lado, se llevaron a cabo distintas estrategias de sobreexpresion de Msn2p, factor transcripcional de la ruta general de respuesta a est