Expresion y secrecion de proteinas heterologas en lactobacillus casei
- PEREZ ARELLANO M. ISABEL
- Gaspar Pérez Martínez Zuzendaria
Defentsa unibertsitatea: Universitat de València
Fecha de defensa: 2002(e)ko otsaila-(a)k 18
- Daniel Ramón Vidal Presidentea
- Francisco J. Silva Idazkaria
- Paloma López García Kidea
- Sergi Ferrer Soler Kidea
- Jan Maarten van Dijl Kidea
Mota: Tesia
Laburpena
En esta tesis se han desarrollado dos subfamilias de vectores de clonación para L. Casei (una con origen PAMB1 y la otra con origen PWV01) Además se ha construído un vector de expresión con el promotor de la lactosa y se ha expresado la proteina verde fluorescente, la betaglucuronidasa. Se han hecho estudios con este promotor sobre su estabilidad y sus caracteristicas estructurales. Se ha secretado la a amilasa de bolicheniformis con el promotor de la lactosa y se ha comparado con otros vectores con el mismo gen reporte. Se han visto diferentes tasas de expresión y secreción en distintos azucares, explicados parcialmente por un efecto de regresión por catabolito. Se ha secretado la VP8* en L. Lactis en cantidades de O.S. Pg/ml y se ha visto que retiene su capacidad hemoaglutinante. Se ha secretado la VP8* en L.Casei y se ha hecho un estudio sobre las condiciones optimas de secreción. Se ha bisto que el procesado de la VP8* en esta construcción depende de la temperatura, y no se realiza a 30ºC.