Canvis epigènetics de la cromatina associats al programa de mort cel.Lular

Resumen

Durante la apoptosis se producen diversos procesos nucleares característicos, tales como la fragmentación internucleosomal del DNA, la condensación de la cromatina, la degradación de proteínas por caspasas y la liberación de histonas de la cromatina. Aunque estos procesos nucleares contribuyeron a la propia definición de apoptosis no existe una completa comprensión de los mismos. Es posible que las modificaciones post-traduccionales de las histonas estén implicadas en estos procesos. En esta tesis doctoral se han investigado los cambios epigenéticos de la cromatina durante la apoptosis utilizando como modelo dos líneas celulares de leucemia y dos agentes pro-apoptóticos. En primer lugar, se han analizado los cambios globales en el patrón de modificación de las histonas y el DNA. Se ha observado que la apoptosis está asociada con un descenso sutil en el grado de acetilación de las histonas así como una disminución en el contenido de metilcitosina. Además, se ha determinado que las histonas que son liberadas de la cormatina durante la aopotosis se encuentran más hipoacetiladas que las que permanecen asociadas a la cromatina. La fracción de la histonas H4 que es liberada de la cromatina en apoptosis posee un patrón de metilación específico respecto a la que permanece asociada a la cromatina. El DNA asociado a estas fracción liberada se encuentra hipometilado y procede la región de heterocromatina perinuclear. Se ha realizado un análisis global de la expresión mediante el uso de microarrays tras la inducción de apoptosis. Se ha observado un descenso generalizado en la expresión, aunque algunos genes aparecen sobreexpresados. Mediante ensayos de inmunoprecitipación de cromatina se han analizado los patrones de acetilación asociados con genes reprimidos y sobreexpresados. Entre el primer grupo de genes se ha observado que los patrones de acetilación se corresponden en general con los esperados, según su niv