Expresión de actividades enzimáticas de bacillus sp. En saccharomyces cerevisiae

Resumen

Saccharomyces cerevisiae es la levadura del pan, el vino y la cerveza, por lo que puede considerarse un microorganismo no patógeno. La pared celular de S. cerevisiae está compuesta por beta-1,3 y beta-1,6-glucanos, quitina y manoproteínas. Las manoproteínas se dividen en tres grandes grupos de acuerdo con el tipo de enlaces que determinan su retención en la pared celular: unidas a través de enlaces no covalentes, unidas a través de enlaces covalentes y unidas a través de puentes disulfuro. El grupo de manoproteínas unidas a través de puentes disulfuro incluye al menos dos miembros de la familia de las Pir (Proteins with Internal Repeats), Pir2 y Pir4, caracterizadas como tales por nuestro grupo. Esta familia se caracteriza por una estructura común, compuesta por un péptido señal y una subunidad I que es separada de la subunidad II a nivel del Golgi por efecto de la proteasa Kex2p. La subunidad II corresponde a la proteína madura tal como se extrae de las paredes celulares aisladas por tratamiento con agentes reductores y se caracteriza por la presencia de una región carboxi-terminal muy conservada que contiene cuatro cisteínas en posiciones fijas que son determinantes para la retención de la proteína en la pared celular. Mediante técnicas de Ingeniería Genética, se han creado proteínas híbridas que incluyen la región codificante de la lipasa A de Bacillus subtilis, pectinasa A de Paenibacillus barcinonensis y celulasa A de P. barcinonensis, a excepción del péptido señal, y parte de la proteína Pir4 de la pared celular de S. cerevisiae.