Determinación de aditivos y contaminantes orgánicos de interés en seguridad alimentaria por hplc-ms

Resumen

La presente tesis describe el desarrollo de cuatro metodologías analíticas automatizadas y sensibles para la determinación de ciertos contaminantes orgánicos de interés en seguridad alimentaria: bisfenol A diglicidil éter, bisfenol F diglicidil éter y derivados, acrilamida, ácido domoico y algunos colorantes azoicos. En todos los estudios se han utilizado técnicas sostenibles y automáticas como la extracción asistida por microondas (MAE) o mediante líquidos presurizados (PLE), para la recuperación de estos contaminantes desde muestras de alimentos. En el caso del bisfenol A diglicidil éter, bisfenol F diglicidil éter y sus productos derivados se han utilizado ambas metodologías. Para el resto de los contaminantes (acrilamida, ácido domoico y colorantes azoicos) se ha empleado únicamente PLE. Para cada uno de los analitos se ha optimizado el proceso de extracción, bien utilizando una metodología convencional de optimización univariante o mediante métodos de diseño de experimentos (DOE). En general, los parámetros objeto de optimización han sido el tipo de disolvente, el tiempo de extracción, la temperatura y la presión. En algunos casos el nuevo procedimiento de extracción propuesto se ha comparado con el procedimiento de extracción convencional. En la etapa de purificación, se han desarrollado procedimientos basados en partición líquido-líquido (LLP) seguida de columnas de extracción en fase sólida (SPE) (bisfenol A diglicidil éter, bisfenol F diglicidil éter y derivados), incorporación de la fase sólida en la celda de extracción por PLE (acrilamida y ácido domoico) y purificación basada en la cromatografía de permeación por gel (GPC) (colorantes azoicos). Esta última técnica permite la automatización de ésta etapa, y logra una elevada eficacia y productividad. Para la detección de los diferentes contaminantes se ha empleado la cromatografía liquida de alta eficacia acoplada a un detector de masas de triple cuadrupolo en modo de seguimiento de la reacción seleccionada (SRM). Los valores de los parámetros que tienen una mayor incidencia en la eficacia de la respuesta analítica en MS-MS, se han optimizado en todos los casos mediante el empleo de DOE. Para la ionización de bisfenol A diglicidil éter, bisfenol F diglicidil éter y derivados se utilizó una interfase APCI. En la detección de acrilamida y ácido domoico se estudió la variación de la respuesta analítica utilizando diversas interfases en la fuente de ionización: ESI, APCI, APPI y una fuente combinada APPI/APCI. Para la acrilamida, APCI resultó proporcionar la mejor señal mientras que en el análisis de ácido domoico se utilizó finalmente la fuente de ESI. Para el aseguramiento de la calidad se han validado según la norma EN/ISO/IEC 17025 las diferentes metodologías desarrolladas, determinando sus características de calidad más relevantes (límite de detección (LOD), límite de cuantificación (LOQ), linealidad, exactitud y precisión) y los métodos se han aplicado a muestras reales dentro de los programas de control oficial.