Estudio del estrés oxidativo en pacientes con enfermedad renal crónicaprediálisis, hemodiálisis y diálisis peritoneal

Zusammenfassung

INTRODUCCION: La principal causa de morbi-mortalidad en la enfermedad renal crónica (ERC) es la causa cardiovascular. Cuando se comparan las tasas de mortalidad anual por edades y por esta causa respecto a la población general, observamos la gran diferencia que existe entre ambas curvas, mucho más importante en los sectores más jóvenes de la población. Al comparar la mortalidad según la técnica de diálisis que reciben observamos que la mortalidad es inferior en los pacientes en Diálisis Peritoneal (DP). Los pacientes con ERC están expuestos a multitud de factores de riesgo cardiovascular, no sólo los clásicos del estudio Framingham, sino también a toda una serie de factores, denominados emergentes y que están ampliamente presentes en estos enfermos. Las propias técnicas de diálisis pueden estar aportando factores de riesgo añadidos, debido al proceso de bioincopatibilidad que aportan materiales y técnicas implicados en el proceso de depuración extrarrenal. Además la uremia es per se, uno de los predictores de riesgo cardiovascular más potentes que existen. El estrés oxidativo surge del desequilibrio entre sustancias oxidantes y antioxidantes a favor de las primeras, lo que conducirá al daño molecular de lípidos, proteínas y DNA. Entre las evidencias que existen, se han descritos valores elevados de lípidos proteínas y DNA oxidados en pacientes con ERC, así como defectos en su sistema defensivo antioxidante. Se han descrito además lipoproteínas oxidadas por ácido hipocloroso en lesiones de arteriosclerosis de los enfermos con ERC. HIPOTESIS DE TRABAJO: La hipótesis de trabajo se basa en la confirmación de que en la ERC existe un desequilibrio entre factores oxidantes y antioxidantes generando un estado de estrés oxidativo y de que, si existen diferencias significativas entre las distintas situaciones de ERC (Prediálisis (Pre-D), Hemodiálisis (HD) y Diálisis Peritoneal (DP), se podrán cuantificar e intentar establecer la influencia de las técnicas de diálisis en el control del balance oxidativo. OBJETIVOS: Principal: Valorar mediante el análisis de parámetros pro-oxidantes y antioxidantes la cuantía del desequilibrio oxidativo en tres poblaciones diferentes de insuficiencia renal crónica, y el efecto que sobre él tienen las técnicas de sustitución renal. Secundarios: Valorar: - El impacto de la diabetes, antecedentes de cardiopatía isquémica o enfermedad cerebrovascular como factores clásicos de riesgo cardiovascular sobre el estrés oxidativo. - La posible relación del estrés oxidativo con el filtrado glomerular en el grupo Pre-D. - La influencia del tiempo de permanencia en la técnica de diálisis o la función renal residual en el grupo DP sobre el estrés oxidativo. - La influencia de la edad en el desarrollo del estrés oxidativo. PACIENTES Y MÉTODOS: Se establecieron tres grupos de estudio: Pre-D: 32 pacientes, HD: 31 pacientes y DP: 30 pacientes procedentes del Servicio de Nefrología del Hospital Clínico Universitario de Valencia. Contamos con un grupo control de 67 sujetos sanos Se registraron datos epidemiológicos y antecedentes personales y se determinaron parámetros de bioquímica general, así como de estrés oxidativo, estos últimos en el Departamento de Bioquímica y Biología Molecular de la Facultad de Medicina de Valencia. La Metodología empleada para el análisis del estrés oxidativo fue la siguiente: Parámetros derivados de la oxidación molecular: - Malonildialdehído (MDA), Glutation oxidado/reducido (GSSG/GSH), 8-oxo-dG nuclear y mitocondrial: en linfocitos por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). - F2-Isoprostanos y Proteínas carboniladas: en plasma mediante ELISA. Enzimas antioxidantes: - Superóxido Dismutasa (SOD), Catalasa, Glutation Peroxidasa (GPX) y Glutation Reductasa (GSR): en linfocitos, mediante ensayo espectofotométrico. RESULTADOS: Los resultados demostraron que existe un aumento significativo del estrés oxidativo en todas las poblaciones estudiadas y con afectación de todas las líneas estudiadas, respecto al grupo control. Existía además alta prevalencia de factores tradicionales de riesgo cardiovascular, especialmente en la población en Pre-D. Era además esta población la que tenía la media más elevada de la mayoría de parámetros oxidados: MDA, GSSG/GSH, proteínas carboniladas y 8-oxo-dG nuclear y mitocondrial, todos con diferencias significativas con el grupo DP y con HD en GSSG/GSH y proteínas carboniladas. Las enzimas antioxidantes estaban disminuidas en todas las poblaciones de forma significativa respecto al grupo control. Encontramos baja correlación con el MDRD en el grupo Pre-D y con Función Renal Residual en el grupo DP. El grupo de diabéticos tenía niveles significativamente superiores en F2-Isoprostanos, 8-oxo-dG mitocondrial y catalasa. Existía una baja correlación en cuanto al tiempo de permanencia en técnica de diálisis y una alta correlación con la edad. CONCLUSIONES: Existe un aumento del estrés oxidativo en la población con enfermedad renal crónica, definido por un aumento de macromoléculas oxidadas, tanto lípidos, proteínas como material genético y un descenso de la actividad de las principales enzimas antioxidantes. La población en Pre-D presenta peor perfil oxidativo, lo que induce a pensar que es el estado urémico per se uno de los principales causantes, aunque la alta prevalencia de factores comórbidos como la diabetes y la hipertensión en el grupo Pre-D también justificarían el desequilibrio entre oxidación y antioxidación. Los grupos Pre-D y HD presentaban mayor estado inflamatorio definido por niveles altos de PCR de alta sensibilidad. La menor carga oxidativa en los pacientes en DP se justificaría por el uso de una técnica más biocompatible unido a las características especiales de dicha población