Aislamiento y caracterización de los genes UBI3 y UBI4 de Candida albicans

Resumo

Se han aislado y caracterizado los genes UB13 y UB14 de Candida albicans. El gen UB14 codifica la poliubiquitina, proteína formada por tres subunidades ubiquitina. El análisis mediante Southern blot demostró la existencia de una sóla copia de UB14 por genoma haploide. El análisis mediante Northern blot demostró qu este gen se expresa tanto en levadura como en micclio y que su expresión se induce por estrés térmico. La función del gen clonado se caracterizó por su capacidad para complementar el fenotipo de hipersensibilidad al estrés térmico en el mutante UB14 de Saccharomyces cerevisial. El estudio fenotípico del mutante nulo reveló que el gen UB14 mantiene bloqueada la capacidad de medición en condiciones en los que c. Albicans crece como levadura y además mantiene unos niveles bajos de "switching fenotípico". El gen UB13 codifica una proteína ribosomal unida en su extremo N-terminal a una subunidad de ubiquitina. El análisis mediante southern blot demostró la existencia de una sola copia de UB13 por genoma haploide. El análisis mediante Northern blot indicó que la expresión de este gen se inhibe en condiciones de estrés térmico y nutricional y ésta se correlaciona con el crecimiento celular. La función del gen clonado se caracterizó por su capacidad para complementar el fenotipo de lento crecimiento en el mutante UB13 de S. Cerevisiae. El análisis fenotípico del mutante nulo condicioanl reveló que se trata de un gen esencial.