Optimización del enriquecimiento de nauplios de Artemia mediante el uso de emulsiones lipídicas formuladas a partir de aceites sintéticos ricos en DHA

Résumé

Los nauplios de Artemia se utilizan como presa viva en criaderos de organimos marinos de todo el mundo debido a su disponibilidad y digestibilidad, pero su valor nutricional no se ajusta a las demandas o necesidades de las larvas de peces, moluscos o crustáceos marinos, ya que carecen de los ácidos grasos esenciales (EFA, Essential Fatty Acids) para estos organismos. Por tanto, es indispensable llevar a cabo un enriquecimiento de los nauplios de Artemia. El enriquecimiento consiste en incubaciones en agua de mar en la que se dispersan productos ricos en EFA y que serán incorporados de forma pasiva por los nauplios debido a su naturaleza de filtradores. A pesar de los muchos avances que se han hecho en este campo, el enriquecimiento en EFA de nauplios de Artemia continúa siendo un proceso ineficaz. Mientras que el enriquecimiento en ácido araquidónico (20:4n-6, ARA) y ácido eicosapentaenoico (20:5n-3, EPA) se ha logrado fácilmente, el enriquecimiento en ácido docosahexaenoico (22:6n-3, DHA) sigue siendo dificultoso debido a factores específicos que limitan su incorporación a los nauplios de Artemia, como los mecanismos de autoxidación de los ácidos grasos altamente insaturados (HUFA) de la emulsión, que pueden ser especialmente severos con el DHA en comparación con otros HUFA debido a su larga cadena y alto grado de insaturación, y a la existencia de procesos de retroconversión. Para superar los efectos adversos del enriquecimiento es necesario desarrollar nuevas estrategias que permitan aumentar el contenido en DHA de los nauplios de Artemia. Con el fin de hacer frente a estos problemas durante el enriquecimiento, se investigó la eficacia de una nueva emulsión lipídica (M70), con un 70 % de DHA en su composición. Se probaron diferentes condiciones de enriquecimiento con el fin de establecer un uso óptimo de la emulsión M70. Las condiciones de enriquecimiento ensayadas fueron diferentes regímenes de oxigenación, temperaturas de incubación, concentraciones de producto enriquecedor y modos de dosificación, y de densidad naupliar. Todos estos parámetros se han considerado como relevantes durante el proceso de enriquecimiento de presas vivas. Los resultados indican que la utilización eficiente de la emulsión M70 para nauplios de Artemia se logra con una temperatura de incubación de 28ºC, una aireación baja/moderada (1 L min-1) y una densidad naupliar de 300 individuos por mL, ya que la eficacia del enriquecimiento no varió entre 150 y 300 individuos por mL. Por otra parte, la emulsión M70 se puede administrar a nauplios recién eclosionados mediante una única dosis de hasta 0,8 g L-1 al comienzo del enriquecimiento sin que la mortalidad naupliar sea evidente. Los resultados en incorporación de DHA con la emulsión M70, aunque prometedores y más elevados que los alcanzados con enriquecedores comerciales, sugieren la existencia de algún factor que impide un enriquecimiento eficiente. A pesar de que M70 contiene en su formulación un antioxidante liposoluble no se puede descartar la oxidación del DHA como causa de la limitada incorporación de este ácido graso en los nauplios de Artemia. La inclusión de un antioxidante soluble en agua, puede ser una opción a la hora de evitar o prevenir la oxidación del DHA durante el enriquecimiento de Artemia. El hidroxitirosol (3,4-dihidroxifeniletanol) es una molécula polar que se encuentra en la fracción acuosa resultantes tras el proceso de molienda de las olivas, con un alto poder antioxidante mayor que el de las vitaminas antioxidantes y el de algunos antioxidantes sintéticos. Teniendo en cuenta que no hay datos disponibles sobre su papel como agente protector de las emulsiones lipídicas empleadas para el enriquecimiento de presas vivas, se propuso investigar el efecto protector de la adición de dicho antioxidante utilizando el compuesto natural Hytolive Protect (Genosa I + D SI, Málaga, España) durante el enriquecimiento de nauplios de Artemia con M70. Para llevar a cabo este propósito, se determinaron las enzimas clave (superóxido dismutas, catalasa, glutatión peroxidasa y glutatión-S-transferasa) como biomarcadores de la actividad antioxidante, y la peroxidación lipídica (LPO) de los nauplios de Artemia enriquecidos. La utilización de Hytolive mejoró la actividad enzimática y la peroxidación lipídica de los nauplios de Artemia enriquecidos con M70 haciéndola más similar a la de los grupos control sin enriquecer. Asimismo, los resultados muestran que los niveles de DHA más elevados se obtuvieron en los nauplios enriquecidos con M70 suplementado con Hytolive. El análisis quimiométrico de los datos sugiere claramente, que la acción protectora del hidroxitirosol está teniendo lugar. El estudio sobre la utilización de la emulsión M70 se completó con la utilización de Artemia enriquecida con dicha emulsión para la alimentación de paralarvas de pulpo común (Octopus vulgaris) en condiciones semi-industriales. En los últimos años, el pulpo ha sido un candidato prometedor para la acuicultura, pero, hasta la fecha, la cría de paralarvas está severamente limitada por la falta de éxito en la fase planctónica, con mortalidades generalizadas que se producen antes del asentamiento de los juveniles, habiéndose apuntado la carencia de ácidos grasos esenciales del alimento como una de las posibles causas. Se comparó el uso de metanauplios enriquecidos con M70 frente a otros enriquecidos con Isochrysis galbana y Nannochloropsis sp. (tratamiento Nanno), analizando el efecto de dichas dietas sobre la composición de ácidos grasos de los lípidos totales, polares y neutros de las paralarvas. Los resultados muestran que las paralarvas alimentadas con Artemia enriquecida con M70 tenían niveles de DHA más elevados, tanto en los lípidos totales como en los polares. A fecha de hoy, la relación entre la supervivencia y la composición cualitativa de los lípidos de la dieta de las paralarvas de pulpo está aún por esclarecer. Este experimento constató que la elevada cantidad de DHA de la emulsión lipídica M70, se trasladó a las paralarvas de pulpo alimentadas con este tratamiento, evidenciándose como un medio eficaz de incrementar el contenido en DHA en la dieta y en la composición corporal final de larvas de O. vulgaris, y por extrapolación, de otras especies marinas. En conclusión, la utilización de la emulsión M70 para el enriquecimiento de nauplios de Artemia es una herramienta útil que produce unos excelentes resultados en cuanto a niveles de DHA alcanzados, y que incluso revierte la relación DHA/EPA de los nauplios, haciéndola más similar a la de las presas naturales de las larvas de organismos marinos. Asimismo es un medio eficaz de transferir DHA a organismos larvarios en cultivo.