Estudio de la penetración de agente antiinfecciosos en macrófagos utilizando eritrocitos portadores

Resumen

[ES] El primer objetivo de este trabajo ha sido realizar una completa revisión bibliográfica acerca de la problemática en el tratamiento de las infecciones intracelulares. También se recogen los distintos tipos de sistemas portadores existentes en la actualidad y las ventajas que éstos aportan en el tratamiento de estas infecciones, ya que facilitan el acceso de los agentes antiinfeciosos al interior celular. El segundo objetivo de este trabajo ha sido la puesta a punto y validación de distintas técnicas analíticas que permitan la cuantificación de los fármacos estudiados en diferentes tipos de muestras biológicas, como eritrocitos, macrófagos, plasma y tejidos. Se han puesto a punto una técnica de HPLC-fluorescencia para la cuantificación de amicacina, una técnica de HPLC-ultravioleta para la cuantificación de zidovudina en eritrocitos, y una técnica de UPLC-MS/MS para la cuantificación de zidovudina en plasma y tejidos. El tercer objetivo de este trabajo ha sido la puesta a punto y optimización de métodos que permitan la encapsulación en eritrocitos de rata de los fármacos seleccionados. Para la encapsulación de amicacina se ha utilizado una técnica de diálisis hipotónica que ha sido puesta a punto previamente en nuestro laboratorio. Posteriormente, esta técnica se ha optimizado para la encapsulación del antirretroviral zidovudina. Para ello se ha estudiado la influencia de diferentes factores como la cantidad inicial de fármaco, el tiempo de diálisis, y la relación de volúmenes diálisis/tampón hipotónico, tanto en el rendimiento de encapsulación como en las propiedades hematológicas de los eritrocitos. Finalmente, el cuarto objetivo de este trabajo ha sido el estudio de la penetración de amicacina y zidovudina en macrófagos tanto in vitro como in vivo, así como los cambios en la farmacocinética y en la distribución tisular de estos fármacos en ratas cuando se administran incorporados en eritrocitos portadores por vía intraperitoneal, en comparación con su utilización en forma libre.