Mecanismos implicados en la proliferación y muerte celular inducidas por la ciclosporina a en cultivos primarios de hepatocitos de rata

Résumé

En este trabajo se han investigado los efectos proliferativos y tóxicos de la ciclosporinaA(CsA) utilizando como modelo experimental los cultivos primarios de hepatocitos de rata. El tratamiento de los hepatocitos con concentraciones crecientes de este fármaco(0-50 uM) provoca un incremento en los niveles de especies reactivas de oxígeno(concretamente de peróxidos) como consecuencia de la pérdida de coordinación entre los sistemas enzimáticos antioxidantes endógenos superóxido dismutasa(SOD) y catalasa, lo que da lugar a una situación de estrés oxidativo que induce la muerte celular por apoptosis o necrosis dependiendo de la dosis de CsA utilizada. La CsA durante tiempos cortos de incubación(1 y 3 horas),induce la activación de los factores de transcripción NF-kB y AP-1 implicados, entre otros, en el control de la proliferación celular y en situaciones de estrés oxidativo. El tratamiento de los hepatocitos con elevadas dosis de CsA(50 uM) y durante largos tiempos de incubación, induce la respuesta al estrés en dichas células, como queda demostrado por la activación del factor HSF1 e incrementos en la proteína y en el RNAm de la HSP70, relacionándose estos hechos con la situación de estrés oxidativo. La CsA induce el aumento en los niveles de ciclina D1.PCNA, y ciclina E a las 3 y 6 horas de incubación, lo que conduce a una situación proliferativa de los hepatocitos. Sin embargo a las 22 horas de incubación, el incremento de p27 y posiblemente la situación de estrés oxidativo generada por la CsA, junto con la disminución de los niveles de ciclina D1,PCNA y ciclina E, provocaría la salida de los hepatocitos de la fase de síntesis(fase S) o impediría su entrada enla misma. La incubación de los hepatocitos con vitamina E, atenúa la situación de estrés oxidativo provocada por la CsA, disminuyendo así la muerte celular por necrosis, lo que corrobora el papel de las especies reactivas de oxígeno en la hepatoto