Mejora de la produccion de alcaloides derivados de n-metil putrecina en cultivos de raices transformadas
- MOYANO CLARAMUNT , ELISABETH
- Javier Palazón Barandela Director
- Mercedes Bonfill Baldrich Co-director
Defence university: Universitat de Barcelona
Fecha de defensa: 15 December 2001
- Rosa María Cusidó Vidal Secretary
- Albert Boronat Committee member
- Nello Bagni Committee member
- Juan Segura García del Río Committee member
Type: Thesis
Abstract
En este trabajo se han estudiado los efectos que los genes del T-DNA de Agrobacterium rhizogenes tienen sobre el crecimiento y la producción de los cultivos de raíces transformadas de las especies. Nicotiana tabacum, Datara metel y Duboisia híbrida, que son productoras de alcaloides derivados de N-metilputrescina. El interés de estas últimas especies se debe a que constituyen la fuente natural de alcaloides tropánicos, compuestos que son ampliamente utilizados en medicina como anticolinérgicos. El análisis molecular del DNA de las raíces reveló la importancia de la integración de los genes aux1, ags y mas del pRi de Agrobacterium en el genoma de las células transformadas Además, y dado el interés comercial de estos compuestos, se ha intentado mejorar su bioproducción en cultivo in vitro mediante técnicas de ingenieria metabólica, concretamente y dado que estos alcaloides también derivan, como hemos mencionado, de la N-metilputrescina, se ha introducio el gen del tabaco que codifica para la N-metilputrescina transferasa(pmt) en el genoma de las células de D. Metel y del híbrido de Duboisia, y se ha provocado su sobreexpresión en los cultivos de raíces transformadas de ambas especies. Con ello se ha logrado mejorar la producción de alcaloides en Nicotina tabacum y en Datura metel. Por el contrario, en el híbrido de Duboisia, la formación de alcaloides tropánicos se ve también limitada en pasos posteriores al catalizado por la enzima N-metilputrescina transferasa.